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細(xì)菌室應(yīng)注意的一些事項(xiàng)
細(xì)菌室應(yīng)注意的一些事項(xiàng)【摘要】 從檢驗(yàn)人員培訓(xùn)、消毒、工作態(tài)度、質(zhì)量控制、檢驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、使用抗菌藥物、菌種保存及廢棄物管理等幾個(gè)方面總結(jié)分析了臨床微生物檢驗(yàn)注意的一些事項(xiàng)。
【關(guān)鍵詞】 臨床微生物； 檢驗(yàn)； 問題； 措施
隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的迅速發(fā)展，超級(jí)細(xì)菌的出現(xiàn)，細(xì)菌工作已引起人們的高度關(guān)注。筆者結(jié)合本醫(yī)院的實(shí)際情況， 對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室的一些注意事項(xiàng)總結(jié)如下。
1加強(qiáng)院內(nèi)感染知識(shí)培訓(xùn)和自我防護(hù)培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)為職業(yè)道德教育，醫(yī)院感染管理的法律法規(guī)，相關(guān)的規(guī)章制度和操作規(guī)程[1].醫(yī)院內(nèi)部患者聚集，因而是病原體高度集中的場所，某些醫(yī)院感染病原菌在潮濕環(huán)境中存活較久，進(jìn)入易感患者體內(nèi)，導(dǎo)致醫(yī)院感染，故定期對(duì)醫(yī)院的科室和病房做微生物監(jiān)測(cè)，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染源，并制定預(yù)防感染和控制感染的措施。如反饋實(shí)驗(yàn)室資料：微生物檢驗(yàn)室應(yīng)每天對(duì)臨床各種標(biāo)本進(jìn)行耐藥譜匯總，并定期報(bào)告醫(yī)院感染控制部門，控制部門提供信息給臨床，以便臨床醫(yī)師了解醫(yī)院的主要流行病原菌及耐藥譜，加強(qiáng)合理使用抗生素；定期總計(jì)細(xì)菌藥敏試驗(yàn)。醫(yī)院內(nèi)的感染監(jiān)測(cè)與控制工作與微生物檢驗(yàn)室的水平密切相關(guān)故微生物檢驗(yàn)工作者的專業(yè)素養(yǎng)應(yīng)得到訓(xùn)練與提高。應(yīng)提高檢驗(yàn)工作者的理論素養(yǎng)，并豐富感染性疾病診斷、治療方面的相關(guān)知識(shí)。應(yīng)調(diào)動(dòng)檢驗(yàn)工作者的積極主動(dòng)性，在快速準(zhǔn)確做好病原菌診斷的基礎(chǔ)上，及時(shí)與臨床進(jìn)行有效溝通。檢驗(yàn)工作者應(yīng)把醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)工作當(dāng)成自己的責(zé)任和使命，指導(dǎo)臨床實(shí)施科學(xué)的消毒和隔離，真正發(fā)揮微生物檢驗(yàn)工作者在醫(yī)院感染控制工作中的重要作用。操作時(shí)戴帽子、口罩， 必要時(shí)穿隔離衣、膠鞋、戴手套， 隨時(shí)注意手的清潔、消毒。其人員應(yīng)進(jìn)行定期健康體檢及必要的預(yù)防接種，增強(qiáng)自身抵抗力。
2做好消毒工作室內(nèi)定時(shí)通風(fēng)、紫外線照射， 物體表面用消毒液擦拭， 嚴(yán)格劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)， 增加設(shè)施投入， 房間布局合理， 防止危險(xiǎn)因素?cái)U(kuò)散， 每月進(jìn)行室內(nèi)微生物學(xué)檢測(cè)。紫外線消毒具有比較多的優(yōu)勢(shì)，張璐曾在研究中指出其優(yōu)點(diǎn)：（1） 高效率殺菌性能： 紫外線一般在使用1——2 s 后對(duì)細(xì)菌、病毒的殺菌即可達(dá)到99%——99.9%的殺菌率； （2） 高效的廣譜性， 紫外線殺菌具有最高的光譜性非選擇性的， 在進(jìn)行有效照射后， 它對(duì)幾乎所有的細(xì)菌、病毒等均達(dá)到高效率殺滅； （3） 無二次污染可能，在進(jìn)行紫外線消毒殺菌過程中， 不添加任何化學(xué)藥劑， 純物理消毒， 因此沒有對(duì)周圍環(huán)境產(chǎn)生二次污染的可能性； （4） 紫外線殺菌設(shè)備簡單， 占用空間小， 運(yùn)行維護(hù)費(fèi)用低， 因此總投資較少， 成本低[2].
3檢驗(yàn)人員的態(tài)度問題臨床微生物檢驗(yàn)至今為止仍不能完全脫離手工，許多結(jié)果的判斷仍有賴于工作人員的主觀判斷。因此，檢驗(yàn)人員的工作態(tài)度直接影響檢驗(yàn)結(jié)果。臨床微生物檢驗(yàn)涉及的環(huán)節(jié)較多，任何一個(gè)環(huán)節(jié)中細(xì)小的差錯(cuò)，就有可能導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果改變，甚至可能會(huì)誤導(dǎo)臨床治療。臨床微生物檢驗(yàn)人員在日常工作中必須嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行操作，時(shí)刻將每一位患者的安危系于心，牢記自己的工作職責(zé)。
4質(zhì)量控制要到位質(zhì)量控制（室內(nèi)、室間）是實(shí)驗(yàn)室的支柱，從時(shí)間段來看，包括分析前、中、后，工作中注意細(xì)節(jié)，就可以回顧性解決一些實(shí)際問題。堅(jiān)持室內(nèi)質(zhì)量控制是做好室間質(zhì)量控制的前提， 室內(nèi)質(zhì)量控制項(xiàng)目應(yīng)包括標(biāo)本采集、培養(yǎng)基、試劑、判斷血清、藥敏紙片等。如：采集的標(biāo)本不合格， 這方面問題較多的是痰液和尿液標(biāo)本， 對(duì)于痰液標(biāo)本， 正確的留取方法是先讓患者用清水漱口3次， 然后囑其用力從氣管深部咳出痰液， 吐入無菌容器內(nèi)送檢。 而實(shí)際情況是很多醫(yī)院在采用自然咳痰法留取痰液標(biāo)本時(shí)， 臨床醫(yī)生和護(hù)士不做必要的指導(dǎo)， 直接讓患者留痰， 這樣得到的痰標(biāo)本常常造成氣管、 咽喉及口腔常居菌的嚴(yán)重污染， 有的可能根本沒有痰液成分， 這樣結(jié)果常導(dǎo)致致病菌和常居菌混淆， 造成誤檢誤報(bào)。 對(duì)于尿液標(biāo)本， 應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同的采集方法， 如疑為尿道炎或做衣原體培養(yǎng)檢查， 應(yīng)取前段尿3——4ml; 如懷疑為膀胱炎或腎炎， 多采用中段尿采集法； 為進(jìn)一步確定菌尿是否來自腎臟， 可用導(dǎo)尿管采集腎盂尿。如做厭氧培養(yǎng)， 需采用膀胱穿刺采集法。 而結(jié)核分枝桿菌的集菌檢查要留取24h尿液， 自然沉淀或加40%明礬形成沉淀后取沉淀送檢。標(biāo)本質(zhì)量的另一問題是采集時(shí)間， 常規(guī)要求應(yīng)在疾病的早期、 急性期、 癥狀典型時(shí)和用藥之前采集標(biāo)本， 對(duì)于已用藥的患者應(yīng)停藥3天后采集標(biāo)本； 不能停藥的， 應(yīng)在下次用藥之前采集，而且需將標(biāo)本接種在含有藥物中和劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。選擇購買理想的成品培養(yǎng)基，知名大公司的生化反應(yīng)管及進(jìn)口藥敏紙片；對(duì)于較難鑒定的菌種， 必要時(shí)對(duì)一些生化反應(yīng)多做幾次， 以達(dá)到正確鑒定的目的；參考資料非常重要，要求做到全新， 要經(jīng)常不斷地更新知識(shí)， 接受新信息， 從本質(zhì)上提高解決疑難問題的能力。而參加細(xì)菌學(xué)室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)， 則是對(duì)實(shí)驗(yàn)室的工作水平作出的綜合判斷， 也是對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的檢驗(yàn)， 對(duì)于提高細(xì)菌鑒定水平， 獲取有關(guān)微生物學(xué)的新資料、新方法、新信息、發(fā)現(xiàn)和分析細(xì)菌檢驗(yàn)工作中的錯(cuò)誤原因， 進(jìn)而可以提高細(xì)菌檢驗(yàn)水平和工作質(zhì)量。
5檢驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)在臨床微生物檢驗(yàn)中， 檢驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)是非常重要的， 它直接影響到檢出率的高低。 如結(jié)核桿菌形態(tài)學(xué)檢查中使用的染色法， 有人對(duì)比研究熒光染色法和萋-尼氏抗酸染色法， 結(jié)果熒光染色法檢出陽性率56.9%,萋-尼氏抗酸染色法檢出陽性率39.5%, 兩者差異有顯著性（P<0.01）。在培養(yǎng)檢查上， 培養(yǎng)基選擇和標(biāo)本的前處理對(duì)目的菌的檢出很重要。 對(duì)尿、 痰等臨床標(biāo)本進(jìn)行必要的前處理可除去污染的雜菌， 進(jìn)而明顯提高陽性檢出率，比如用生理鹽水清洗痰液。 在培養(yǎng)基的使用上， 常規(guī)培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基種類有限， 有些目的菌因成分的抑制而在所用的培養(yǎng)基中不生長。 比如， 對(duì)腹瀉患者取糞便分離培養(yǎng)時(shí)， 常規(guī)所用的是伊紅美蘭瓊脂和SS瓊脂平板。 腸桿菌科細(xì)菌能被選擇出來， 但弧菌科有些細(xì)菌 （如副溶血性弧菌） 因其嗜鹽性在這兩種培養(yǎng)基上多不生長。 如果對(duì)這類細(xì)菌仍用常規(guī)培養(yǎng)基分離培養(yǎng)， 其結(jié)果自然是造成漏檢。
6合理使用抗菌藥物 細(xì)菌室人員在藥敏試驗(yàn)時(shí)， 對(duì)病原菌耐藥性變遷起到監(jiān)控作用， 通過對(duì)病原菌耐藥性的總結(jié)和分析， 可獲得病原菌耐藥性變化的資料， 并改變目前病原學(xué)診斷。細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間較長不能適應(yīng)臨床的現(xiàn)狀，應(yīng)盡快提高細(xì)菌快速診斷的水平。根據(jù)病原菌種類及細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果， 合理選用抗菌藥物， 給臨床提供指導(dǎo)， 避免臨床盲目用藥， 控制耐藥菌株的產(chǎn)生， 減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)， 防止醫(yī)院感染的發(fā)生。
7做好菌種保存與管理[3]收集、保存與管理菌種， 是微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作中一項(xiàng)重要內(nèi)容。尤其是計(jì)量認(rèn)證實(shí)施后， 實(shí)驗(yàn)室的工作都要程序化、規(guī)范化， 對(duì)菌種的保存和管理也提出了更嚴(yán)格的要求， 收集、保存與管理好菌種， 對(duì)提高微生物檢驗(yàn)工作的質(zhì)量至關(guān)重要。對(duì)一般細(xì)菌的保存， 如大腸桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌等直接接種普通瓊脂斜面， 35℃培養(yǎng)18——24h后， 放入4℃冰箱， 可保存1——2 個(gè)月。 對(duì)白色念珠菌的保存： 一般采用沙保羅氏瓊脂斜面， 28℃培養(yǎng)48——72h后， 放入4℃冰箱， 可保存2——3個(gè)月。對(duì)烈性細(xì)菌的保存： 如霍亂弧菌等， 應(yīng)該采取及時(shí)送上級(jí)單位， 若暫時(shí)未能上送的菌種應(yīng)有專人保管。保存菌種的安全問題， 應(yīng)專門制定一個(gè)菌種保管程序性文件， 明確職責(zé)，健全菌種檔案， 認(rèn)真作好登記， 統(tǒng)一編號(hào)， 按規(guī)定條件保存，以備用。實(shí)驗(yàn)完畢后， 要及時(shí)銷毀菌株， 并做好記錄，嚴(yán)防病原菌外泄、污染。
8做好廢棄物管理一次性醫(yī)療用品、器具用后消毒、毀形、焚燒， 專人管理無害化處理， 并進(jìn)行登記。
【參考文獻(xiàn)】
1葉應(yīng)嫵，王毓三。全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程。南京： 東南大學(xué)出版社，1991: 399-400.
2張璐。 關(guān)于紫外線筷子消毒機(jī)消毒效果的評(píng)價(jià)。 山西醫(yī)藥雜志， 2009, 38 （9）： 820.
3陳秀英。菌種保存方法的比較。中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志， 2002,12（2）：231.
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